產(chǎn)品中心
PRODUCT CENTER
快速內(nèi)毒素清除試劑盒
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貨號(hào) |
產(chǎn)品名稱 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
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MKE101 |
BcMag? 快速內(nèi)毒素清除試劑盒 試劑盒組分： 2ml：快速內(nèi)毒素清除磁珠 10ml：10*再生緩沖液 |
2 ml試劑盒 |
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MKE102 |
BcMag? 快速內(nèi)毒素清除磁珠 |
5 ml |
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MKE103 |
10*再生緩沖液 |
20ml |
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Specificities |
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組成 |
表連接有多粘菌素B的超順磁珠 |
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磁化強(qiáng)度 |
~60 EMU/g |
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磁化類型 |
超順磁 |
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有效濃度 |
2.5 g/ml |
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濃度 |
50 mg/ml ( d2H2O ) |
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結(jié)合能力 |
≥ 9,995 EU (內(nèi)毒素單位) / ml |
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儲(chǔ)存 |
室溫運(yùn)輸，收到后保存在 4°C . |
內(nèi)毒素，又叫做脂多糖（LPS），是一種具有復(fù)雜分子結(jié)構(gòu)的熱原。它最內(nèi)層核心區(qū)域由疏水性脂肪酸基團(tuán)組成，中部和最外層區(qū)域由親水性多糖組成（圖1）。它們是組成革蘭氏陰性細(xì)菌病原體（如大腸桿菌、沙門氏菌、志賀菌、假單胞菌、奈瑟菌、流感嗜血桿菌、百日咳桿菌和霍亂弧菌）細(xì)胞壁外膜的一部分。它們?cè)诩?xì)菌細(xì)胞破壞（死亡、細(xì)胞溶解）后釋放到血液循環(huán)中。
圖一：內(nèi)毒素結(jié)構(gòu)
內(nèi)毒素是生物產(chǎn)品中發(fā)現(xiàn)的主要污染物，它是引發(fā)生物效應(yīng)研究產(chǎn)生不利影響主要成分物質(zhì)。在生物技術(shù)行業(yè)中，革蘭氏陰性菌（如大腸桿菌）被廣泛用于生產(chǎn)重組類產(chǎn)品，如蛋白質(zhì)、質(zhì)粒DNA和疫苗等。這些產(chǎn)品在生產(chǎn)過程中非常容易被內(nèi)毒素污染。去除生物產(chǎn)品中的內(nèi)毒素是非常關(guān)鍵的步驟，因?yàn)樗鼤?huì)導(dǎo)致多種病理性生理效應(yīng)，如發(fā)熱、顫抖、感染性休克、中毒性肺炎和呼吸系統(tǒng)癥狀。
去除內(nèi)毒素是蛋白質(zhì)或DNA純化過程中最具挑戰(zhàn)性的下游過程之一。目前，有幾種方法可用于減少生物樣品制劑的內(nèi)毒素污染，包括親和色譜法，如固定化多粘菌素B、L-組氨酸和聚L-賴氨酸；陰離子交換色譜法；凝膠過濾；超濾；蔗糖梯度離心和Triton X-114液相分離。這些技術(shù)在減少生物樣品內(nèi)毒素污染方面的成功與否在很大程度上取決于目標(biāo)分子的性質(zhì)。例如，超濾和離子交換色譜法是去除內(nèi)毒素污染物的常用技術(shù)。雖然超濾可以有效地去除水中的內(nèi)毒素，但它不適用于蛋白質(zhì)溶液樣品，因?yàn)?/span>強(qiáng)大的外力因素會(huì)損壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)。而使用陰離子交換方法可以有效地去除內(nèi)毒素，但因為目標(biāo)生物分子也會(huì)被吸附而導(dǎo)致生物樣品的回收率降低。目前，市場上銷售的許多內(nèi)毒素去除產(chǎn)品都是由傳統(tǒng)色譜基質(zhì)制成，如瓊脂糖樹脂或色譜柱。使用這些材質(zhì)的純化產(chǎn)品使得內(nèi)毒素去除過程繁瑣、耗時(shí)，無法對(duì)微量生物樣品進(jìn)行處理，并且難以適應(yīng)自動(dòng)化設(shè)備。Bioclone公司開發(fā)出一種非常高效的基于磁珠的內(nèi)毒素去除系統(tǒng)來克服這些問題。
BcMag? Quick Endotoxin Removing Resin是一種共價(jià)鏈接有高密度，多聚混合素B的磁性微球。本款產(chǎn)品是專門為快速去除各種生物樣品中的內(nèi)毒素而設(shè)計(jì)的。多粘菌素B是一種多肽類抗生素，對(duì)大多數(shù)內(nèi)毒素的脂質(zhì)a部分具有非常高的結(jié)合力。本款磁珠兼具了親和蛋白純化的特點(diǎn)（低成本、操作簡單、高特異性和大容量）和具有磁性的優(yōu)勢，可以實(shí)現(xiàn)高效的手動(dòng)或自動(dòng)高通量快速去除內(nèi)毒素過程。
操作流程
用磁性微粒進(jìn)行純化過程非常簡單（圖2）。只需要將磁珠與樣品混合，并連續(xù)旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)足夠的時(shí)間就可以完成純化。在混勻過程中，磁珠保持懸浮在樣品溶液中，使內(nèi)毒素與磁珠表面被固定的多粘菌素B充分結(jié)合。孵育完成后，沉淀磁珠，使用磁力分離架將其與樣品分離。將無內(nèi)毒素上清液轉(zhuǎn)移至新試管中。
圖2 ：內(nèi)毒素清除過程
